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由图7A可知，在2000帧的轨迹中，EGCG与SGS之间的质心距离先下降，后增加，最后呈现整体下降的趋势，该结果与图6所示结合轨迹一致。

慢性毒性长期小剂量接触空气中的二氧化硫，会导致嗅觉迟钝、慢性鼻炎、支气管炎、肺通气功能和免疫功能下降。亚硫酸盐与酸反应产生二氧化硫，后者遇水形成亚硫酸。

相关链接：二氧化硫，亚硫酸钠，钙声明：本文所用图片、文字来源《海关总署》，版权归原作者所有。严重者可引起肺部弥漫性间质纤维化和中毒性肺硬变。因此，二氧化硫类物质是食品加工过程中常用的漂白剂和防腐剂。经食品摄入硫磺、二氧化硫、亚硫酸钠、焦亚硫酸钠和低亚硫酸钠等二氧化硫类物质，是食品工业中常用的食品添加剂（其在食品中的残留量用二氧化硫计算），如果在食品加工生产过程中使用了类似漂白剂，食品中就会含有二氧化硫。人对空气中二氧化硫的嗅觉阈0.03mg/L，刺激阈为0.01mg/L，0.03mg/L只能耐受1分钟。

工业废气熔炼硫化物矿石或燃烧含硫染料时均可产生二氧化硫而污染大气，这是常见的一种工业废气。人体接触二氧化硫的途径职业接触制造硫酸、硫酸盐及漂白、制冷、熏蒸消毒剂的工人，均可通过生产过程接触到二氧化硫。五是积极发展高效、低毒、低残留的农药品种，禁止使用淘汰的农药品种。

各种药剂因其分解、消失的速度不同，作物的生长趋势和季节也不同，因而具有不同的安全间隔期，收获时该作物离最后喷药的时间越远越好3 结论本文研究了经体外模拟胃肠道消化的卵白蛋白产物的抗氧化性。2.4 合成肽的体外抗氧化活性2.4.1 ABTS+清除能力测定3种合成肽的ABTS自由基清除活性如图7所示。值得注意的是，ROS含量在低质量浓度（0.01mg/mL）和中质量浓度（0.1mg/mL）组表现出浓度依赖性，而在中质量浓度（0.1mg/mL）和高质量浓度（1mg/mL）组没有表现出由于浓度产生的差异。

另一方面，由于通路蛋白受体饱和。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系。

分子质量＜1ku的产物对H2O2诱导的Caco-2细胞氧化损伤具有保护作用。如图5所示，对照组荧光强度最低，即细胞内ROS含量最低，而损伤组细胞荧光强度与对照组相比显著增加，表明由于H2O2对细胞的损伤作用，细胞发生氧化应激，细胞内ROS显著增加。相关链接：氨基酸，半胱氨酸，胱氨酸声明：本文所用图片、文字来源《中国食品学报》，版权归原作者所有。研究表明，多肽的抗氧化活性与氨基酸组成有关，CFDV和CVSP的强ABTS+清除能力可能与肽链N端的半胱氨酸（C）有关，半胱氨酸含有的硫醇基能直接与自由基反应，从而增强了其清除自由基的能力。

2.4.2 ORAC测定合成的3种纯肽的氧自由基吸收能力结果如图8所示。利用电喷雾轨道阱对扫描离子进行碰撞诱导解离（Colli-sion-InducedDissociation，CID），在低能CID下（10～200eV），多肽链只在酰胺键处发生断裂，因此主要产生b离子和y离子碎片。不同于ABTS自由基清除活性，3种合成肽均表现出较强的氧自由基吸收能力，10g/mL的CFDV、CVSP和MPFR的ORAC值分别为1.87，1.28和1.57g/mLTE/g/mL，均高于同浓度的Trolox（1g/mLTE/g/mL），说明，3个多肽的体外抗氧化能力较强，这与多肽中含有Phe（F）、Val（V）以及Met（M）等疏水性氨基酸有关。研究表明，蛋白或肽段可能是由于刺激了细胞内与抗氧化相关的信号通路，从而发挥抗氧化作用。

那么，消化产物对细胞内ROS的清除在中、高浓度组无差异的原因可能是：一方面，由于肽被细胞吸收的量达到饱和。2.3 体外模拟胃肠道消化产物（＜1ku）肽序列鉴定从消化产物中抗氧化活性最强的组分中鉴定出3条肽序列，二级质谱图如图6所示。

CFDV和CVSP表现出明显的ABTS自由基清除能力，并且具有浓度依赖性。其中，MPFR无明显的ABTS自由基清除能力，但是具有较强的ORAC活性，这是由于这两种测定体外抗氧化活性的方法原理的差异导致。

与之相比，MPFR则没有明显的ABTS自由基清除能力，自由基清除率不足5%。以上结果显示，体外模拟胃肠道消化对卵白蛋白抗氧化活性的提高以及抗氧化活性肽段的释放具有积极作用，卵白蛋白经体内消化后抗氧化活性变化规律及机制有待进一步研究。发现体外模拟胃肠道消化能够提高卵白蛋白ABTS+清除活性和ORAC值，并且组分分子质量越小，其抗氧化性越强。3种组分均对细胞内氧化应激产生的ROS具有清除作用，并且具有浓度依赖性。采用文献中报道的从头测序的方法，对多肽序列进行鉴定，得到3条四肽，分别为CFDV、CVSP和MPFR，通过与已知卵白蛋白氨基酸序列对比，这3条肽分别位于卵白蛋白12～15、383～386和197～200氨基酸残基。CFDV、CVSP和MPFR均表现出较强的氧自由基吸收能力。

如图5所示，0.1mg/mL的体外模拟胃肠道消化产物（＜1ku）的荧光强度与对照组无显著性差异，说明其已经能将氧化损伤的Ca-co-2细胞内的ROS清除到接近正常水平，具有较强的细胞抗氧化活性。与混合组分体外模拟胃肠道消化产物（＜1ku）相比，CFDV和CVSP在较低质量浓度范围（0.5，1，5和10g/mL）就能表现混合组分相当的ABTS自由基清除能力，在质量浓度为10g/mL时，这两种肽的ABTS自由基清除活性已经接近100%，说明这两种合成肽的ABTS自由基清除能力高于混合组分体外模拟胃肠道消化产物（＜1ku）。

而经过消化产物预先处理的试验组，除低质量浓度（0.01mg/mL）的体外模拟胃肠道消化产物（3～10ku）外，均与损伤组存在显著性差异（P＜0.05），表明消化产物能够减少细胞氧化损伤产生的过量ROS。从抗氧化活性最强的组分（分子质量＜1ku的产物）鉴定出3条四肽序列，结果显示CFDV和CVSP表现出明显的ABTS+清除能力，并且具有浓度依赖性。

2.2.3 卵白蛋白消化产物对Caco-2细胞内ROS的清除作用DCF的荧光强度反映了细胞内ROS的含量那么，消化产物对细胞内ROS的清除在中、高浓度组无差异的原因可能是：一方面，由于肽被细胞吸收的量达到饱和。

相关链接：氨基酸，半胱氨酸，胱氨酸声明：本文所用图片、文字来源《中国食品学报》，版权归原作者所有。2.4.2 ORAC测定合成的3种纯肽的氧自由基吸收能力结果如图8所示。2.3 体外模拟胃肠道消化产物（＜1ku）肽序列鉴定从消化产物中抗氧化活性最强的组分中鉴定出3条肽序列，二级质谱图如图6所示。3 结论本文研究了经体外模拟胃肠道消化的卵白蛋白产物的抗氧化性。

从抗氧化活性最强的组分（分子质量＜1ku的产物）鉴定出3条四肽序列，结果显示CFDV和CVSP表现出明显的ABTS+清除能力，并且具有浓度依赖性。2.2.3 卵白蛋白消化产物对Caco-2细胞内ROS的清除作用DCF的荧光强度反映了细胞内ROS的含量。

利用电喷雾轨道阱对扫描离子进行碰撞诱导解离（Colli-sion-InducedDissociation，CID），在低能CID下（10～200eV），多肽链只在酰胺键处发生断裂，因此主要产生b离子和y离子碎片。其中，MPFR无明显的ABTS自由基清除能力，但是具有较强的ORAC活性，这是由于这两种测定体外抗氧化活性的方法原理的差异导致。

发现体外模拟胃肠道消化能够提高卵白蛋白ABTS+清除活性和ORAC值，并且组分分子质量越小，其抗氧化性越强。如图5所示，0.1mg/mL的体外模拟胃肠道消化产物（＜1ku）的荧光强度与对照组无显著性差异，说明其已经能将氧化损伤的Ca-co-2细胞内的ROS清除到接近正常水平，具有较强的细胞抗氧化活性。

研究表明，多肽的抗氧化活性与氨基酸组成有关，CFDV和CVSP的强ABTS+清除能力可能与肽链N端的半胱氨酸（C）有关，半胱氨酸含有的硫醇基能直接与自由基反应，从而增强了其清除自由基的能力。分子质量＜1ku的产物对H2O2诱导的Caco-2细胞氧化损伤具有保护作用。2.4 合成肽的体外抗氧化活性2.4.1 ABTS+清除能力测定3种合成肽的ABTS自由基清除活性如图7所示。另一方面，由于通路蛋白受体饱和。

如图5所示，对照组荧光强度最低，即细胞内ROS含量最低，而损伤组细胞荧光强度与对照组相比显著增加，表明由于H2O2对细胞的损伤作用，细胞发生氧化应激，细胞内ROS显著增加。研究表明，蛋白或肽段可能是由于刺激了细胞内与抗氧化相关的信号通路，从而发挥抗氧化作用。

与之相比，MPFR则没有明显的ABTS自由基清除能力，自由基清除率不足5%。采用文献中报道的从头测序的方法，对多肽序列进行鉴定，得到3条四肽，分别为CFDV、CVSP和MPFR，通过与已知卵白蛋白氨基酸序列对比，这3条肽分别位于卵白蛋白12～15、383～386和197～200氨基酸残基。

3种组分均对细胞内氧化应激产生的ROS具有清除作用，并且具有浓度依赖性。以上结果显示，体外模拟胃肠道消化对卵白蛋白抗氧化活性的提高以及抗氧化活性肽段的释放具有积极作用，卵白蛋白经体内消化后抗氧化活性变化规律及机制有待进一步研究。